\

Какие вакцины выращивают в среде куриного эмбриона?

Неэтические прививки: факты и мифы

От редакции : Вопрос о неэтических прививках, выработанных на основе абортивного материала, давно обсуждается в католической Церкви. Не так давно эту тему затронул портал «Православие и мир». Новая сложная и спорная во многом тема вызвала большой интерес читателей и породила бурную дискуссию.

Данная тема поднимает и другой вопрос чрезвычайной важности: об использовании фетального материала в медицине. Тема эта настолько сложная, что комментировать ее отказались многие специалисты, работающие как в сфере вакцинации, так и в области биоэтики. Подчеркнем это. Мы пробуем поднять и обсудить тему в то время, как многие специалисты отказываются от какого-либо комментария. Именно поэтому мы приглашаем к дискуссии врачей, ученых, специалистов по биоэтике! Будем рады услышать ваше мнение и продолжить дальнейшее обсуждение темы.

Предлагаем вниманию читателей статью Владислава Зарайского, Ph.D., сотрудника Департамента молекулярной медицины Школы Медицины Бостонского Университета, подробно освещающую вопросы технологии производства «неэтических» вакцин.

Прививать или не прививать? Не из опасений по поводу осложнений со здоровьем или нехваткой вакцин на всех, а из внезапно открывшейся информации о том, что для создания вакцин используются клетки абортированных младенцев. Внезапно поднятая дискуссия выглядит достаточно странно, сенсационно и, как часто случается с сенсациями, малограмотно.

Факт первый

Большая часть вакцин производится при помощи куриных эмбрионов.

Да-да, порой вакцины производятся из тех самых яиц, из которых можно сделать яичницу и омлет, а ещё можно приспособить их под фабрику по производству вирусов. Этот механизм очень трудоёмкий и достаточно затратный, что обуславливает опасения по поводу нехватки вакцин в случае пандемии гриппа (к примеру, «куриного гриппа») – невозможно приготовить такое количество яиц в короткий срок. Но, в большинстве вакцин (корь, паротит и т.п.) используются культивированные клетки куриных эмбрионов. Другая значительная часть вакцин производится при помощи культивированных клеток перепелов (особенно много таких вакцин в России).

Факт второй

Сама вакцина представляет собой смесь ослабленных или уже мёртвых вирусов, стабилизирующих веществ (обычно желатина) и антибиотиков (к примеру, неомицина).

Для того, чтобы приготовить вакцину, её выращивают в курином яйце или в культуре клеток, а затем несколько раз центрифугируют, титруют и фильтруют. Любая живая клетка больше любого (за исключением одного, Мимивируса) вируса – клетки многоклеточных организмов превышают размеры вирусов минимум в тысячу раз (и минимум в 25 раз размеры мимивируса).

Таким образом, если что-то и попадает в вакцину после всех этих процедур помимо самих вирусов, то это обломки живых клеток, те самые «следы клеток», что упоминаются в подробном описании состава вакцин. Чаще всего такими обломками оказываются растворимые в воде белки, имеющие общее название альбумины. Отличительной чертой этих белков является их способность связываться с липидами или другими белками. Именно наличие альбуминов в прививках и вызывает часто отторжение – есть люди с аллергией на куриный белок и им нельзя колоть прививки, выращенные в куриных яйцах. Но белок лишь маленький кирпичик клетки и мы не можем говорить, что в вакцинах, произведённых с помощью куриных яиц, присутствуют куриные клетки. Или что в вакцинах, произведённых с помощью человеческих клеток, присутствуют человеческие клетки.

Факт третий

Дифференцированные человеческие клетки могут делиться примерно 52 раза в течение жизни человека.

Что это означает? Что качества клеток изменяются, клеточные механизмы начинают сбоить, хромосомы укорачиваются (а мужская Y хромосома вообще почти исчезает к восьмидесяти годам) — это называется старение. Оно может быть не только у организма, но и у одной конкретно взятой клетки конкретного органа или ткани. Обойти этот предел в 52 деления (т.н. предел Хейфлека) можно двумя путями. Путь первый – клетка не дифференцируется (не становится клеткой лёгких, сердца, мозга), остаётся стволовой клеткой. Путь второй – клетка становится раковой и делится бесконечное количество раз (хотя у неё наверняка искажены многие клеточные механизмы).

Но если мы возьмём, к примеру, одну-единственную клетку лёгочной ткани куриного эмбриона и дадим ей разделиться в течение шестнадцати дней (то есть пятнадцать раз количество будет удваиваться, говоря математическим языком – пятнадцатая производная), то в конце эксперимента, в шестнадцатом пассаже, как это называют биологи, будет 2 в пятнадцатой степени клеток. 32768 клеток. Каждая из которых будет в себе нести, в лучшем случае, 1/32768 часть от оригинальной клетки, а скорей всего и того меньше. Будет ли каждая из этих 32768 клеток идентична оригинальной – в своём генетическом наборе и функциональных свойствах, да. Как был человеком наш предок пятнадцать поколений назад, во времена Иулиании Лазаревской и Дионисия Радонежского. Какая из этих 32768 клеток является оригинальной? Уже не узнать. Как не можем мы быть абсолютно похожими на нашего предка.

То же самое с человеческими клетками – в культуре клеток, поддерживаемой в лаборатории, они делятся не раз и не два, и всё дальше уходят от своих оригинальных предшественниц.

Факт четвёртый

Культуры человеческих клеток, в которых производят вакцины, были созданы сорок пять лет назад.

Создание стандартной клеточной линии занимает несколько лет и обычно настолько забюрократизировано, что создавать новую клеточную линию становится просто невыгодно. Это, кстати, понимали американские консерваторы, когда запретили создание новых клеточных линий эмбриональных стволовых клеток. В итоге учёные оказались не с несколькими десятками, как было объявлено, клеточных линий, а только с шестью, что замедлило исследования на многие годы.

Похожая ситуация обстоит с клеточными линиями для производства вакцин, только здесь нет особой нужды в создании разнообразия клеток, а наоборот – необходим строгий стандарт и контроль. Клеточные линии WI 38 и MRC 5, созданные, соответственно, в 1960х годах в США и Великобритании, были неоднократно размножены (как минимум 15 раз, как сказали автору статьи в американском клеточном депозитарии), заморожены в жидком азоте и хранятся в нескольких депозитариях в разных частях света. Время от времени их размораживают, высаживают в питательную среду, заражают вирусами, после чего из этой культуры вирусов производят вакцину. Производить вакцины в других, малоизученных клеточных линиях, небезопасно (хотя сейчас и ведутся подобные небесспорные разработки для вакцин от СПИДа и Эболы) – а ну как к вирусам прилепится какой-нибудь белок, который окажется онкогенным фактором у части пациентов? или просто аллергеном? или будет затруднять выработку иммунитета у вакцинированного человека? Здесь же уже всё понятно и запротоколировано. В том числе и происхождение данных клеточных линий, которые были созданы на основе клеток абортированных плодов на третьем месяце беременности.

Факт пятый

Для производства вакцины для краснухи сейчас используются клеточные линии, для создания которых были использованы образцы клеток абортированных плодов.

Зачем потребовались клетки плода? Да всё из-за того же предела Хейфлека (открытого как раз создателем клеточной линии WI 38) – если мы возьмём клетки даже младенца, то может оказаться, что они уже двадцать-тридцать раз поделились и от 52, последнего деления, отстоят не так далеко. А нам ведь надо их изучать, стандартизировать и т.п., а потом ещё и много лет использовать для производства вакцин, не зная, когда же они состарятся настолько, что начнут давать сбои.

Потому-то в беззаботные 1960е годы, когда биоэтика была на зародышевом уровне, и были проведены исследования, позволившие использовать без зазрения совести клетки от уже абортированных младенцев из семей со здоровой наследственностью. Да и сам вирус был выделен в США в те же простодушные, с биоэтической точки зрения, годы из клеток абортированного плода, заражённого краснухой (в Японии почему-то догадались просто взять мазок клеток из полости рта больного ребёнка). Разумеется, никто не делал аборты специально для дальнейших исследований, но воспользоваться уже сделанным убийством плода шведские и американские учёные не преминули. Результатом этих исследований явились идеальные, с утилитарной точки зрения, клеточные линии: никаких отклонений в генетическом коде и максимально возможное количество будущих делений, что оказалось очень полезным для процесса производства вакцин для краснухи.

Почему не были взяты клетки выкидыша? Сейчас уже трудно сказать, вероятно, из-за опасения, что выкидыш мог случиться из-за болезней и отклонений, которые могут повлиять на качество клеточной линии (по схожей причине вакцины не производят в раковых клетках, на которых не распространяется предел Хейфлека, — из-за боязни возможных осложнений).

Именно эти клеточные линии и вызвали ненужный ажиотаж через сорок лет после их появления. Ажиотаж понятный, поскольку для их создания были взяты образцы клеток абортированных плодов на третьем месяце беременности. Факты, которые послужили причиной протестов и дискуссий, казалось бы, просты: одним из этапов некоего процесса был аборт, результатом же этого процесса стала вакцина. Но факты всегда оставляют место для трактовок, и когда люди уже хотят отказываться от любых вакцин, поскольку в них «содержится абортированный материал», то это уже не правда, а ложь. Даже в вакцине, содержащей вирусы, выращенные в клетках WI 38, нет «абортированного материала» – даже 1/32768 части оного мифического материала. И вакцины не создают на основе убитых младенцев – их создают на основе вирусов, выросших в культивированных клетках.

Христианин (православный ли, католик, протестант, монофизит) не может одобрить аборт, тем более, когда он совершается потому, что у родителей уже много детей (так, по некоторым данным, был абортирован плод, давший клетки для клеточной линии WI 38), и на душе остаётся неприятный осадок. Зло, содеянное родителями и врачами, остаётся злом. Низкие моральные планки учёных, захотевших работать с образцами клеток из этих эмбрионов во имя удачного эксперимента, остаются недоумием и проблемами на совести учёных. Необходимость развивать науку, чтобы избавиться от подобного наследия недавнего прошлого, и, в том числе, создавать новые вакцины (на основе иных технологий, иных принципов, порой даже просто органического синтеза пептидов, без какой-либо привязки к клеточным линиям) остаётся неизбежной необходимостью. Наша обязанность молиться за душу той безгрешной безымянной шведской девочки, которая был умерщвлена ещё в чреве матери и разобрана на образцы клеток, остаётся нашей обязанностью.

Куриные эмбрионы борются с гриппом

Отечественные производители вакцин против гриппа выходят на новый современный уровень: их собственные разработки успешно конкурируют с импортными аналогами

Российские ученые разработали лучшие в мире вакцины против гриппа — с минимальной реактогенностью и высокой иммуногенностью, они хорошо переносятся организмом человека и формируют стойкий иммунитет в течение полугода после прививки. И теперь наша задача — выйти на полную самодостаточность в производстве иммунобиологических препаратов и укрепить свои позиции на мировом рынке», — заявила министр здравоохранения РФ Вероника Скворцова на открытии нового гриппозного цеха в санкт-петербургском НИИ вакцин и сывороток (НИИВС).

На разработку гриппозных вакцин нового поколения «Микрофлю» (препарат против сезонного гриппа) и «Микропан» (против пандемии гриппа) ушло почти два года. При этом сам цех модернизировали всего за полгода. Инвестиции в новое производство составили 733 млн рублей. По словам директора НИИВС Виктора Трухина , сегодня в России только его предприятие производит вакцины против гриппа полного цикла и имеет сертификацию по международному стандарту GMP (Good Manufacturing Practice). Это означает, что НИИВС не только получит преимущество в госзаказах, но и сможет выходить на экспортные рынки. На днях компания уже заключила договор на поставку своих уникальных вакцин в десяток стран Центральной и Южной Америки, а теперь намерена вести переговоры с рядом европейских и азиатских стран.

Рынок растет

Грипп — одна из самых распространенных в мире вирусных инфекций, на каждые 2000 случаев заболевания регистрируется один летальный исход. Однако непосредственной причиной смерти грипп становится лишь в 25% случаев, остальные вызваны осложнениями, наиболее частые среди которых — заболевания легких и сердца. По данным Федерального центра гриппа РФ, во время ежегодных эпидемий на долю гриппа и его осложнений в общей смертности приходится до 40% случаев. Большинство смертельных исходов у взрослых приходится на людей старше 65 лет. У детей максимальный показатель (35%) смертности от гриппа отмечается среди пациентов в возрасте до двух лет, причем этот показатель превышает смертность среди взрослых в десятки раз.

Сегодня основные отечественные вакцины против гриппа в России — «Гриппол» и «Гриппол плюс», их доля среди отечественных вакцин составляет 90%. Они закупаются государством с 2006 года в рамках Национального календаря прививок для массовой иммунизации. В России ежегодно производится свыше 40 млн доз вакцин против гриппа. В прошлом году было привито 40 млн человек (27% общей численности населения страны), из них за счет средств федерального бюджета — более 33 млн. «При таком числе вакцинируемых стоимость рынка гриппозных вакцин может составлять до 7,4 миллиарда рублей ежегодно, что сопоставимо с затратами на весь остальной Национальный календарь прививок. К этой сумме можно смело добавить 20 процентов — это средства, которые тратят наши граждане, покупающие вакцины в аптеках», — говорит руководитель Центра социальной экономики Давид Мелик-Гусейнов .

Читайте также  Определение столбнячного токсина в нервах

Самые известные компании — производители вакцин на российском рынке — «Петровакс Фарм», «Микроген» и санкт-петербургский НИИВС. Все они активно сотрудничают друг с другом. Например, по лицензии «Петровакса» вакцина «Гриппол» производится на заводе компании «Микроген» в Уфе и на заводе НИИВС в Санкт-Петербурге. А «Микроген» и НИИВС осуществляют трансфер технологий в области противогриппозных и живых вакцин.

«Наши специалисты принимали активное участие в модернизации гриппозного цеха по стандарту GMP в НИИВС — решали проблемы взаимодействия с проектными, инжиниринговыми и технологическими партнерами, разрабатывали варианты финансирования проекта без привлечения бюджетных средств и прочее. В ближайшее время мы планируем применять подобную практику на наших производственных площадках», — комментирует генеральный директор компании «Микроген» Петр Каныгин .

В перспективе рынок производства вакцин против гриппа будет только расти. Буквально на прошлой неделе в силу вступил приказ Минздрава, согласно которому список граждан для вакцинации против гриппа с этого года будет расширен. Раньше, согласно Национальному календарю, против гриппа ежегодно могли бесплатно прививаться дети с шестимесячного возраста и молодежь до 22–23 лет, а также взрослые, работающие в определенных сферах (работники медицинских и образовательных учреждений, транспорта, коммунальной сферы и др.), пенсионеры. С нынешнего года вакцинацию смогут пройти беременные женщины (с условием, что при их иммунизации используются вакцины, не содержащие консервантов), военнослужащие, лица с хроническими заболеваниями, в том числе заболеваниями легких, сердечно-сосудистой системы, метаболическими нарушениями и ожирением.

«Для нашей компании вышеперечисленные изменения крайне важны, поскольку они подразумевают увеличение государственного заказа на вакцины против гриппа более чем на 15 процентов», — поясняет генеральный директор НПО «Петровакс Фарм» Аркадий Некрасов . До конца года его компания планирует поставить более 14 млн доз вакцины «Гриппол плюс». На сопоставимые объемы рассчитывают и в НИИВС.

Экономия и ноу-хау

Особенность производства вакцин против гриппа в НИИВС — полный цикл. Здесь разрабатываются препараты, производится сырье и готовая продукция. Как правило, другие предприятия специализируются на последней производственной стадии, по сути, являясь лишь переработчиками. «Мы выращиваем свои вакцины на куриных эмбрионах, они гораздо эффективнее вакцин из готового концентрата, которые создают с помощью генной инженерии», — рассказывает автор вакцин «Микрофлю» и «Микропан» руководитель гриппозного цеха НИИВС Сергей Мельников .

Новая производственная площадка НИИВС уже завоевала авторитет у иностранных коллег. Так, отраслевой журнал Всемирной научной ассоциации по птицеводству недавно отметил, что мощности санкт-петербургского завода по инкубированию куриных эмбрионов сегодня не только представляют собой образец новейших мировых достижений, они еще и самые крупные (в среднегодовом исчислении) в мире — 28 млн эмбрионов в год. «Мы закладывали параметры наших инкубаторов с учетом двукратного увеличения производительности: если в России возникнет пандемия гриппа, мы сможем произвести вакцину для всей страны», — объясняет Мельников.

Производство вакцины против гриппа происходит следующим образом. Почти каждый год вирус мутирует, поэтому требуется ее модификация. Всемирная организация здравоохранения собирает штаммы и в феврале рассылает их образцы в ведущие производственные компании по всему миру. Как правило, на создание одной гриппозной вакцины к сезону уходит месяц. Выпуск препаратов на заводе длится с конца марта по конец сентября, потому что в основном прививки делаются в октябре сроком на 4–6 месяцев.

«Наши вакцины даже лучше, чем французская “Ваксигрипп”, которая считается одной из наиболее эффективных. Мы разработали целый ряд уникальных технологий, за счет которых наша продукция легче воспринимается организмом человека, к тому же она дешевле», — рассказывает Сергей Мельников. Точную стоимость своей продукции он не называет, но уверен, что вакцины будут удовлетворять требованиям госзаказа. Сейчас в среднем по госзаказу вакцины реализуются по цене 180 рублей. В частных медклиниках, предлагающих привиться всем желающим, цены примерно в четыре-пять раз выше.

Приводя пример собственных инноваций, которые позволяют снижать производственные издержки (например, для получения куриных эмбрионов нужны специальные элитные породы кур), в компании рассказывают о создании участка по получению девятидневных куриных эмбрионов вместо одиннадцатидневных — это позволяет на 25% снизить период инкубации, при этом эмбрион сохраняется здоровым и чистым. Кроме того, в новых вакцинах без ущерба качеству снижена стандартная дозировка вирусного концентрата, что позволяет получить из одного эмбриона большее количество вакцин.

В компании обращают внимание и на особую систему очистки вакцин. «Разработка вирусного концентрата практически везде одинакова, но мы создали свое ноу-хау и уже подали патентную заявку. Мы единственное предприятие в мире, которое в массовом порядке работает с эритроцитами — это нестандартный биологический материал, с помощью которого проводится очистка вирусного концентрата. Если у других предприятий на процесс уходит двое-трое суток, то мы научились делать то же самое всего за четыре-пять часов. При этом качество финальной очистки препарата у нас очень высокое», — говорит Сергей Мельников.

Сейчас цель НИИВС — универсальная вакцина, которая будет защищать от всех штаммов гриппа. Над этой же задачей сегодня работают «Петровакс» и другие производители.

Кому нужны вакцины

Участники рынка высоко оценивают новое производство, называя его появление знаковым событием. «Каждое открытие такой площадки, по стандарту GMP, — это очередная мини-победа российского фармпрома. Это правильный тренд: чистые технологичные помещения, которые позволят отечественным производителям в полной мере заниматься исследовательской работой, осуществлять высококачественное производство, выходить на экспорт», — говорит Давид Мелик-Гусейнов. В качестве примера он приводит Украину, которая в прошлом году, еще задолго до нынешних политических событий, перестала закупать продукцию российских фармкомпаний, которые не перешли на современный стандарт. Так же сейчас поступают и другие страны, особенно дальнее зарубежье.

У специалистов, впрочем, технологии НИИВС вызывают вопросы. На новом производстве отдают предпочтение созданию вакцин против гриппа на куриных эмбрионах, притом что на мировом рынке отдают предпочтение разработкам генной инженерии, несмотря на то что они в несколько раз дороже. Считается, что вакцины, созданные на куриных эмбрионах, более аллергенны. Впрочем, ключевым моментом все же является система очистки препаратов, а у НИИВС она на высоком уровне — именно в этом состоит главное ноу-хау НИИВС, которое позволяет успешно конкурировать с продукцией генной инженерии.

И совсем другой вопрос — удастся ли изменить отношение россиян к вакцинации: пока очень многие прививок не делают. Противники вакцин сетуют на то, что любой искусственный вброс вирусов в организм — это всегда стресс для человека. Без прививки можно и совсем не заболеть, а с прививкой обязательно болезнь перенесешь, пусть и в легкой форме. Всегда ли оправданна такая тренировка для организма? Для людей, которые с точки зрения здоровья находятся в группе риска, эта ситуация может оказаться очень опасной. Есть и те, кто считает, что вакцинация полезна лишь в целях экономии: как правило, вакцина дешевле лекарств, которые приходится принимать, когда заболел. «Нужна нормальная разъяснительная работа, — говорит Вероника Скворцова. — Например, при детских инфекциях должна быть тотальная прививка. С нашей стороны главное — гарантировать потребителям качественные современные вакцины, которые хорошо очищены и не имеют побочных реакций».

Минздрав предлагает в ближайшие три-пять лет сформировать единый национальный иммунобиологический кластер, куда войдут все передовые российские фармпредприятия, в том числе НИИВС. «Сегодня мы наблюдаем, что наши производители создают уникальные препараты для лечения не только гриппа, но и других заболеваний», — говорит Вероника Скворцова.

Вакцины с человечиной: этичность «Спутника V» и прочих «коктейлей» от большой фармы под вопросом

Несколько информированных источников указывают на использование клеточных линий абортированного эмбриона человека в антиковидных вакцинах, в том числе – в «Спутнике V» от НИЦ им. Гамалеи. Это серьезный повод вернуться к полемике о допустимости введения подобных «коктейлей» в организм человека. Позиция Русской Православной Церкви по данному вопросу однозначна, тогда как Ватикан в лукавом иезуитском духе недавно начал идти на попятную, продвигая планетарную вакцинацию от коронавируса как «высшее благо» и называя степень соучастия в грехе детоубийства для прививающихся католиков «отдаленной». В контексте партнерства российских вакцинаторов с британской фармкорпорацией AstraZeneca, грозящего медицинскими опытами над российскими гражданами, консервативное общество получает еще один сильный аргумент против масштабного эксперимента с неизвестными последствиями.

Институт Шарлотты Лозье (США), специализирующийся на исследованиях абортов и индустрии абортивных материалов, в сентябре с.г. опубликовал исследование, из которого следует, что при создании и испытании вакцины «Спутник V» использовалась клеточная линия НЕК293, происходящая от абортированного эмбриона человека . Эти сведения подтверждаются информированным источником РИА «Катюша» из отечественной фармпромышленности.

По данным еще одной американской некоммерческой исследовательской организации – Института исследования народонаселения (Population Research Institute, PRI) в настоящее время в разработке находится более 120 вакцин от COVID-19, среди компонентов которых немало «продуктов» индустрии абортов .

Клеточные линии – это клетки, размноженные в искусственной среде и используемые в научных исследованиях. Первичные клетки берут из живого организма, в процессе их могут искусственно изменить для того, чтобы они могли размножаться далее вне живой ткани, в специальных средах. В разработках ряда вакцин используются клеточные линии, полученные из органов нерожденных детей, убитых посредством аборта. Таковой является клеточная линия НЕК-293, созданная в 1973 году – основой для нее были ткани почки девочки, абортированной в Нидерландах годом раньше. Эту клеточную линию используют американские биотехнологические компании Moderna и Inovio Pharmaceuticals, англо-шведская фармкомпания AstraZeneca, китайская компания CanSino Biologics, сообщает PRI.

Еще одна клеточная линия PER.C6 была создана в 1995 году и использовала клетки из ткани сетчатки 18-недельного мальчика, абортированного в Нидерландах в 1985 году. Ее использует компания Janssen, фармацевтическое подразделение гиганта потребительских товаров Johnson&Johnson. Эти и подобные им разработки получают значительные правительственные гранты.

Фармацевтические компании стараются привлекать к этому факту как можно меньше внимания, чтобы не вызывать возмущения среди пациентов и этических споров. Такие клеточные линии десятилетиями использовались для разработки и производства многих широко используемых вакцин, включая вакцины против кори/эпидемического паротита/краснухи (MMR), краснухи, ветряной оспы, полиомиелита, гепатита А, бешенства и опоясывающего лишая. Для некоторых вакцин, таких как MMR, ветряная оспа и гепатит A, в США и Канаде просто не существует альтернатив, производимых с соблюдением этических норм.

Здесь также важно отметить, что патент на вакцину «Спутник V» отсутствует в интернете в открытом доступе, но внимание активистов православного движения «Сорок Сороков» привлек патент на вакцину от гриппа, которую зарегистрировали в 2013 году те же ученые, которые разрабатывали средство от коронавируса. Замдиректора НИЦ им. Гамалеи Денис Логунов был официальным спикером, представлявшим эту вакцину в информационном пространстве. При внимательном ознакомлении с патентом мы находим в нем сведения об использовании компонентов из человеческих эмбрионов.

Использование клеточных линий плода для производства вакцин давно вызывает серьезные споры среди специалистов по этике и верующих, имеющих глубокие религиозные и моральные возражения против использования человеческих клеточных линий. Останки любого человека должны уважаться и не считаться «отходами» и просто «биоматериалом», иное отношение является преступлением перед человеческой личностью. Медицинская польза не должна оборачиваться поощрением абортов и эвтаназий, ткани и органы могут изыматься только с согласия пациента или его представителей, прочие же останки с уважением погребаются. Такова позиция по этому вопросу Русской Православной Церкви, которую недавно подтвердил председатель Патриаршей комиссии по вопросам семьи, защиты материнства и детства о. Федор Лукьянов.

Приводим прямую цитату о. Федора из онлайн-конференции, организованной Комитетом по здоровью Госдумы в октябре 2020 г. ( смотрите его выступление с 2:32:40 ):

«Этически недопустимым представляется наличие в составе препаратов для иммунопрофилактики, — это очень важно именно с точки зрения Русской Православной Церкви, — компонентов, полученных с использованием клеточных линий, полученных из эмбриональных тканей человека», – отметил священник, далее конкретно назвав клеточную линию HEK-293 как пример абортивной фарминдустрии.

Читайте также  Расстройства пищеварения инфекционного происхождения

А вот Ватикан в этом вопросе снова показал всю глубину своего падения – как и в случае с недавним признанием папой Франциском гомосексуальных «союзов». Ватиканская Конгрегация «Пояснение о моральной допустимости использования некоторых вакцин против КОВИД-19» (документ был одобрен Франциском 17 декабря ) утверждает, что «в содействии злу существуют разные степени ответственности». Например, при использовании клеточных линий незаконного происхождения ответственность тех, кто принимает решение о ее производстве, не идентична ответственности тех, кто не имеет власти решать, а «просто» ставит себе прививку.

«Когда недоступны вакцины против КОВИД-19, которые можно назвать безупречными с этической точки зрения, например, если такие вакцины не предоставляются в распоряжение врачей или если у граждан нет выбора, использовать вакцины, в разработке и производстве которых применялись клеточные линии абортированных эмбрионов, является морально допустимым», – следует из Конгрегации Франциска.

Типичное иезуитство: «если нельзя, но очень надо – то можно». В этой истории также важно отметить, что и с этическими альтернативами клеткам эмбриона человека все не так просто. В тех случаях, когда для производства конкретной вакцины есть альтернативные животные клеточные линии, фармкомпании часто предпочитают использовать клеточные линии человеческого плода, потому что их особенности хорошо известны. Линии, полученные от животных, могут содержать значительное количество патогенных вирусов и бактерий, в том числе и неизученных. Некоторые вирусы, например, ветряная оспа, плохо растут на клетках животных. Клеточные линии человека тоже не являются безупречными, например, имеются сведения об онкогенности указанных выше HEK-293 и PER.C6. О многих побочных эффектах, в том числе длительных, ученые сегодня просто не знают, так как в мире не проводится достаточное количество исследований последствий вакцинации.

По сведениям источника «Катюши», главной мотивацией AstrаZeneca к сотрудничеству с НИЦ им. Гамалеи послужил тот факт, что английская антиковидная вакцина, также основанная на векторе – аденовирусе обезьяны, показала множество негативных побочных эффектов на подопытных людях . Именно по этой причине компания официально сняла с себя всю ответственность за последствия от сделанных гражданами ЕС прививок , переложив ее на местные правительства. В то же время, переносящий белки COVID-19 модифицированный аденовирус человека, используемый в «Спутнике V», потенциально менее опасен, но никто не отменял этических моментов, о которых было рассказано выше. Тот факт, что человеческие клетки лучше подходят для производства определенных вакцин, не оправдывает намеренное убийство нерожденных детей. Разворачивание медицинского бизнеса на останках абортированных младенцев приводит к тому, что аборты поощряются и вознаграждаются, так как проводящие их врачи получают прибыль от фармацевтических корпораций.

Пока мы можем только гадать, как отразятся на здоровье российских граждан экспериментальные прививочные «коктейли», которые увидят свет в результате партнерства НИЦ Гамалеи и AstrаZeneca – с открытостью у глобальной фармы всегда были проблемы. Но уже сейчас очевидно, что для православных христиан участие в «абортивной» кампании вакцинаторов – недопустимо.

Виды вакцин

Открытие метода вакцинации дало старт новой эре борьбы с болезнями.

В состав прививочного материала входят убитые или сильно ослабленные микроорганизмы либо их компоненты (части). Они служат своеобразным муляжом, обучающим иммунную систему давать правильный ответ инфекционным атакам. Вещества, входящие в состав вакцины (прививки), не способны вызвать полноценное заболевание, но могут дать возможность иммунитету запомнить характерные признаки микробов и при встрече с настоящим возбудителем быстро его определить и уничтожить.

Производство вакцин получило массовые масштабы в начале ХХ века, после того как фармацевты научились обезвреживать токсины бактерий. Процесс ослабления потенциальных возбудителей инфекций получил название аттенуации.

Сегодня медицина располагает более, чем 100 видами вакцин от десятков инфекций.

Препараты для иммунизации по основным характеристикам делятся на три основных класса.

  1. Живые вакцины. Защищают от полиомиелита, кори, краснухи, гриппа, эпидемического паротита, ветряной оспы, туберкулеза, ротавирусной инфекции. Основу препарата составляют ослабленные микроорганизмы — возбудители болезней. Их сил недостаточно для развития значительного недомогания у пациента, но хватает, чтобы выработать адекватный иммунный ответ.
  2. Инактивированные вакцины. Прививки против гриппа, брюшного тифа, клещевого энцефалита, бешенства, гепатита А, менингококковой инфекции и др. В составе мертвые (убитые) бактерии или их фрагменты.
  3. Анатоксины (токсоиды). Особым образом обработанные токсины бактерий. На их основе делают прививочный материал от коклюша, столбняка, дифтерии.

В последние годы появился еще один вид вакцин — молекулярные. Материалом для них становятся рекомбинантные белки или их фрагменты, синтезированные в лабораториях путем применения методов генной инженерии (рекомбининтная вакцина против вирусного гепатита В).

Схемы изготовления некоторых видов вакцин

Живые бактериальные

Схема подходит для вакцины БЦЖ, БЦЖ-М.

Живые противовирусные

Схема подходит для производства вакцин от гриппа, ротавируса, герпеса I и II степеней, краснухи, ветряной оспы.

Субстратами для выращивания вирусных штаммов при производстве вакцин могут становиться:

  • куриные эмбрионы;
  • перепелиные эмбриональные фибробласты;
  • первичные клеточные культуры (куриные эмбриональные фибробласты, клетки почек сирийских хомячков);
  • перевиваемые клеточные культуры (MDCK, Vero, MRC-5, BHK, 293).

Первичный сырьевой материал очищают от клеточного дебриса в центрифугах и с помощью сложных фильтров.

Инактивированные антибактериальные вакцины

  • Культивация и очистка штаммов бактерий.
  • Инактивация биомассы.
  • Для расщепленных вакцин клетки микробов дезинтегрируют и осаждают антигены с последующим их хроматографическим выделением.
  • Для конъюгированных вакцин полученные при предыдущей обработке антигены (как правило, полисахаридные) сближают с белком-носителем (конъюгация).

Инактивированные противовирусные вакцины

  • Субстратами для выращивания вирусных штаммов при производстве вакцин могут становиться куриные эмбрионы, перепелиные эмбриональные фибробласты, первичные клеточные культуры (куриные эмбриональные фибробласты, клетки почек сирийских хомячков), перевиваемые клеточные культуры (MDCK, Vero, MRC-5, BHK, 293). Первичная очистка для удаления клеточного дебриса проводится методами ультрацентрифугирования и диафильтрации.
  • Для инактивации используются ультрафиолет, формалин, бета-пропиолактон.
  • В случае приготовления расщепленных или субъединичных вакцин полупродукт подвергают действию детергента с целью разрушить вирусные частицы, а затем выделяют специфические антигены тонкой хроматографией.
  • Человеческий сывороточный альбумин применяется для стабилизации полученного вещества.
  • Криопротекторы (в лиофилизатах): сахароза, поливинилпирролидон, желатин.

Схема подходит для производства прививочного материала против гепатита А, желтой лихорадки, бешенства, гриппа, полиомиелита, клещевого и японского энцефалитов.

Анатоксины

Для дезактивации вредного воздействия токсинов используют методы:

  • химический (обработка спиртом, ацетоном или формальдегидом);
  • физический (подогрев).

Схема подходит для производства вакцин против столбняка и дифтерии.

По данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), на долю инфекционных заболеваний приходится 25 % от общего количества смертей на планете ежегодно. То есть инфекции до сих пор остаются в списке главных причин, обрывающих жизнь человека.

Одним из факторов, способствующих распространению инфекционных и вирусных заболеваний, являются миграция потоков населения и туризм. Перемещение человеческих масс по планете влияет на уровень здоровья нации даже в таких высокоразвитых странах, как США, ОАЭ и государства Евросоюза.

По материалам: «Наука и жизнь» № 3, 2006, «Вакцины: от Дженнера и Пастера до наших дней», академик РАМН В. В. Зверев, директор НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова РАМН.

Задать вопрос специалисту

Вопрос экспертам вакцинопрофилактики

Вопросы и ответы

Я много лет вакцинируюсь от гриппа вакциной французского производителя. В этом году терапевт предложила мне сделать прививку российской вакциной. Я ничего не знаю об отечественных вакцинах, какая из них качественная?

Отвечает Полибин Роман Владимирович

Российские препараты, которыми проводится вакцинацию в рамках ОМС, эффективны и безопасны. Для массовой иммунизации населения Минздравом используются вакцины Совигрипп (НПО «Микроген»), Ультрикс (ООО ФОРТ), УльтриксКвадри (ООО «ФОРТ» иФлю-М (СПбНИИВС ФМБА России). Препараты доказали высокий профиль безопасности и эффективности в ходе полного объема обязательных доклинических и клинических исследований, проведенных в соответствии с требованиями, предъявляемыми регуляторными органами РФ и Европы, а также длительного опыта успешного применения в России и динамики снижения заболеваемости. Подробнее о вакцинах можно узнать на официальных сайтах разработчиков.

Вакцина «Менюгейт» зарегистрирована в России? С какого возраста разрешена к применению?

Отвечает Харит Сусанна Михайловна

Да, зарегистрирована, вакцина – от менингококка С, сейчас также есть вакцина конъюгированная, но уже против 4 типов менингококков – А, С, Y, W135 – Менактра. Прививки проводят с 9 мес.жизни.

Муж транспортировал вакцину РотаТек в другой город.Покупая ее в аптеке мужу посоветовали купить охлаждающий контейнер,и перед поездкой его заморозить в морозильной камере,потом привязать вакцину и так ее транспортировать. Время в пути заняло 5 часов. Можно ли вводить такую вакцину ребенку? Мне кажется,что если привязать вакцину к замороженному контейнеру, то вакцина замерзнет!

Отвечает Харит Сусанна Михайловна

Вы абсолютно правы, если в контейнере был лед. Но если там была смесь воды и льда- вакцина не должна замерзать. Однако живые вакцины, к которым относится ротавирусная, не увеличивают реактогенность при температуре менее 0, в отличие от неживых, а, например, для живой полиомиелитной допускается замораживание до -20 град С.

Моему сыну сейчас 7 месяцев.

В 3 месяца у него случился отек Квинке на молочную смесь Малютка.

Прививку от гепатита сделали в роддоме, вторую в два месяца и третью вчера в семь месяцев. Реакция нормальная, даже без температуры.

Но вот на прививку АКДС нам устно дали медотвод.

Я за прививки!! И хочу сделать прививку АКДС. Но хочу сделать ИНФАНРИКС ГЕКСА. Живем в Крыму. В крыму ее нигде нет. Посоветуйте как поступить в такой ситуации. Может есть зарубежный аналог? Бесплатную делать категорически не хочу. Хочу качественную очищеную, что бы как монжно меньше риска.

Отвечает Полибин Роман Владимирович

В Инфанрикс Гекса содержится компонент против гепатита В. Ребенок полностью привит против гепатита. Поэтому в качестве зарубежного аналога АКДС можно сделать вакцину Пентаксим. Кроме того, следует сказать, что отек Квинке на молочную смесь не является противопоказанием к вакцине АКДС.

Подскажите, пожалуйста, на ком и как тестируют вакцины?

Отвечает Полибин Роман Владимирович

Как и все лекарственные препараты вакцины проходят доклинические исследования (в лаборатории, на животных), а затем клинические на добровольцах (на взрослых, а далее на подростках, детях с разрешения и согласия их родителей). Прежде чем разрешить применение в национальном календаре прививок исследования проводят на большом числе добровольцев, например вакцина против ротавирусной инфекции испытывалась почти на 70 000 в разных странах мира.

Почему на сайте не представлен состав вакцин? Почему до сих пор проводится ежегодная реакция Манту (зачастую не информативна), а не делается анализ по крови, например, квантифероновый тест? Как можно утверждать реакции иммунитета на введенную вакцину, если еще ни кому не известно в принципе, что такое иммунитет и как он работает, особенно если рассматривать каждого отдельно взятого человека?

Отвечает Полибин Роман Владимирович

Состав вакцин изложен в инструкциях к препаратам.

Реакция Манту. По Приказу № 109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерациии» и Санитарным правилам СП 3.1.2.3114-13 «Профилактика туберкулеза», несмотря на наличие новых тестов, детям необходимо ежегодно делать реакцию Манту, но так как этот тест может давать ложноположительные результаты, то при подозрении на тубинфицирование и активную туберкулезную инфекцию проводят Диаскин-тест. Диаскин-тест является высоко чувствительным (эффективным) для выявления активной туберкулезной инфекции (когда идет размножение микобактерий). Однако полностью перейти на Диаскин-тест и не делать реакцию Манту фтизиатры не рекомендуют, так как, он не «улавливает» раннее инфицирование, а это важно, особенно для детей, поскольку профилактика развития локальных форм туберкулеза эффективна именно в раннем периоде инфицирования. Кроме того, инфицирование микобактерией туберкулеза необходимо определять для решения вопроса о ревакцинации БЦЖ. К сожалению, нет ни одного теста, который бы со 100% точностью ответил на вопрос, есть инфицирование микобактерией или заболевание. Квантифероновый тест также выявляет только активные формы туберкулеза. Поэтому при подозрении на инфицирование или заболевание (положительная реакция Манту, контакт с больным, наличие жалоб и пр.) используются комплексные методы (диаскин-тест, квантифероновый тест, рентгенография и др.).

Что касается «иммунитета и как он работает», в настоящее время иммунология — это высокоразвитая наука и многое, в частности, что касается процессов на фоне вакцинации – открыто и хорошо изучено.

Ребёнку 1 год и 8 месяцев, все прививки ставились в соответствии с календарем прививок. В том числе 3 пентаксима и ревакцинация в полтора года тоже пентаксим. В 20 месяцев надо ставить от полиомиелита. Очень всегда переживаю и отношусь тщательно к выбору нужных прививок, вот и сейчас перерыла весь интернет, но так и не могу решить. Мы ставили всегда инъекцию (в пентаксиме). А теперь говорят капли. Но капли-живая вакцина, я боюсь различных побочек и считаю, что лучше перестраховаться. Но вот читала, что капли от полиомиелита вырабатывают больше антител, в том числе и в желудке, то есть более эффективные, чем инъекция. Я запуталась. Поясните, инъекция менее эффективна (имовакс-полио, например)? Отчего ведутся такие разговоры? У каплей боюсь хоть и минимальный, но риск осложнения в виде болезни.

Читайте также  Креатив для ванных комнат

Отвечает Полибин Роман Владимирович

В настоящее время Национальный календарь прививок России предполагает комбинированную схему вакцинации против полиомиелита, т.е. только 2 первых введения инактивированной вакциной и остальные – оральной полиовакциной. Это связано с тем, чтобы полностью исключить риск развития вакциноассоциированного полиомиелита, который возможен только на первое и в минимальном проценте случаев на второе введение. Соответственно, при наличии 2-х и более прививок от полиомиелита инактивированной вакциной, осложнения на живую полиовакцину исключены. Действительно, считалось и признается некоторыми специалистами, что оральная вакцина имеет преимущества, так как формирует местный иммунитет на слизистых кишечника в отличие от ИПВ. Однако сейчас стало известно, что инактивированная вакцина в меньшей степени, но также формирует местный иммунитет. Кроме того, 5 введений вакцины против полиомиелита как оральной живой, так и инактивированной вне зависимости от уровня местного иммунитета на слизистых оболочках кишечника, полностью защищают ребенка от паралитических форм полиомиелита. В связи с вышесказанным вашему ребенку необходимо сделать пятую прививку ОПВ или ИПВ.

Следует также сказать, что на сегодняшний день идет реализация глобального плана Всемирной организации здравоохранения по ликвидации полиомиелита в мире, которая предполагает полный переход всех стран к 2019 году на инактивированную вакцину.

Какие вакцины выращивают в среде куриного эмбриона?

Успехи, достигнутые в борьбе с вирусными заболеваниями, во многом обязаны применению лечебно-профилактических препаратов, изготовленных на клеточных культурах. «Культуральная эра» в ИПВЭ им. М.П. Чумакова РАМН началась с 1954 года — с диагностики эпидемии полиомиелита, с 1956 г. — крупномасштабный выпуск вакцины против полиомиелета на первичных культурах клеток почек обезьян. На этом же субстрате были созданы вакцины против кори и чумы плотоядных. В Институте параллельно готовили вакцину против клещевого энцефалита на первичных культурах куриных эмбрионов.

В 1974 году Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) предложила использовать для производства медицинских биологических препаратов (МИБП) линии диплоидных клеток (1), а позднее и линии гетероплоидных клеток (2). К сожалению, в России до настоящего времени большая часть требуемых препаратов выпускается по-прежнему на первичных культурах клеток.

В лаборатории культур ткани Института было установлено более 100 линий перевиваемых клеток человека, обезьян, крупного рогатого скота, овец, свиней, хомяков, тхорзофреток, морской свинки, кролика. Наиболее перспективные из них сохраняются в жидком азоте.

Линии диплоидных клеток человека обладают неоспоримыми преимуществами перед всеми известными видами культур — способностью сохранять в пассажах стабильными биологические и генетические характеристики, присущие клеткам здорового донора. Стандартность свойств, экономичность и возможность предварительной оценки клеток на безопасность делают диплоидные культуры приемлемым клеточным субстратом для создания МИБП. Начало нашей работы с линиями диплоидных клеток относится к 1962 году. К 1987 г. Было установлено 29 линий диплоидных клеток человека и 4 линии обезьян. В основном линии клеток человека были получены из кожи и мышц эмбриона и одна — из легких эмбриона.

В настоящее время линии наиболее перспективным клеточным субстратом при производстве вакцин считаются линии гетероплоидных клеток. Они обладают высокой пролиферативной активностью, способны расти в промышленных биореакторах, хорошо сохраняются в жидком азоте. Высокая чувствительность гетероплоидных клеток к широкому спектру вирусов позволяет использовать культуры-продуценты, приготовленные из аттестованного банка одной линии, для получения различных вакцин. Нами установлены следующие линии: 455 — из клеток селезенки взрослой зеленой мартышки, 2688 С — из семенников новорожденной зеленой мартышки, 2688 П — из почек той же обезьяны, 2688 М — из мозга того же животного, 4179 — из клеток сердца и языка эмбриона зеленой мартышки, 4647 — из клеток почек взрослой зеленой мартышки, 4921 — из кожи и мышц эмбриона зеленой мартышки, 10251 — из мозжечка зеленой мартышки, 4184 — из клеток почек эмбриона овцы, Таурус 1-3 — из почек теленка.

В результате некачественного хранения культур в криобанке часть линий была утеряна. Теперь мы располагаем 11 линиями диплоидных клеток человека, 1 линией диплоидных клеток зеленой мартышки и 12 линиями гетероплоидных клеток животных. Все оставшиеся линии были обследованы в соответствиями с рекомендациями ВОЗ к вакцинным субстратам и полностью им удовлетворяют. Две линии М-22 и 4647 прошли национальное лицензирование. Линию М-22 разрешено использовать для выпуска всех видов медицинских препаратов, а линию 4647 — для получения инактивированных вакцин.

Характеристика линии М-22. Линия клеток М-22 получена из кожи и мышц 8-недельного эмбриона, выделенного путем аборта от здоровой женщины 32 лет, в анамнезе которой не было онкологических, венерических, генетических заболеваний и врожденных аномалий, а также гепатита и туберкулеза. В фазе становления культура характеризовалась неоднородностью клеточного состава и была представлена фибробластоподобными и эпителиоподобными клетками. К 4-5 пассажам культура стала мономорфной и состояла из фибробластоподобных клеток. Лишь со вступлением в фазу старения вновь появились клетки различной морфологии — полигональные и гипертрофированные. Время жизни линии М-22 вне организма составляет 70 пассажей и складывается из трех фаз: становление — на уровнях 1-3 пассажей, активного роста — на уровнях 4-39 пассажей и старения — на уровнях 40-70 пассажей. При анализе 4000 метафаз, по 1000 метафаз на уровнях 12, 20, 32, 40 пассажей, установлено, что диплоидный набор хромосом имеют 89,7; 92,0; 89,7; 82,0 % метафаз соответственно. Полиплоидные метафазы составляют 1,0; 2,3; 1,7; 1,6 %, гипоплоидные — 9,2; 5,3; 6,9; 4,7 %, гиперплоидные — 0,1; 0,4; 0,2; 0,1 %, разрывы — 0,3; 0,5; 0,2; 0,2 %, пробелы — 1,7; 0,5; 1,3; 0,3 % в той же последовательности.

При обследовании М-22 на стерильность (наличие грибов, бактерий, микоплазм, вирусов) получены отрицательные результаты на уровнях 10, 20, 24, 30, 33, 40 и 42 пассажей. При исследовании культуральных жидкостей и самих клеток на уровнях 10, 20, 30 и 40 пассажей в чувствительных клеточных системах, а также в реакциях гемадсорбции вирусы-контаминанты не обнаруживались. При обследовании клеток М-22 на тех же уровнях пассажей в опытах на взрослых и сосунках белых мышей, кроликах, морских свинках, куриных эмбрионах, иммунодепрессированных мышах линии СВА посторонних агентов также не установлено. Онкогенная активность клеток линии М-22 не выявлена и в опытах in vitro в органной культуре кожи куриного эмбриона.

Изучение изоферментов в клетках линии М-22 выявляет энзимограмму человека и Г6-ФДГ медленного типа. Клетки линии М-22 сохраняют жизнеспособность при длительном хранении в жидком азоте — порядка 70 %.

Линия М-22 чувствительна к заражению вакцинными штаммами А. Сэбина вируса полиомиелита. Титр вируса типа I на уровне 16 пассажа равен 7,74 lg БОЕ/мл, а на уровне 20 пассажа — 7,71, соответствующие показатели для II типа 7,60 и 7,75, а для III типа — 7,63 и 7,65. Клетки линии М-22 также чувствительны к заражению вирусами из групп ЕСНО, Коксаки, рино-. Титр вируса ЕСНО-11 составлял 10 7,5 ТЦД50/мл, а рино — 7∙10 7 ТЦД50/мл.

На линии М-22 приготовлены экспериментальные серии живой коревой вакцины с вакцинным штаммом ЭШЧ. На клетках линии М-22 активно размножается отечественный вакцинный штамм краснухи «Орлов-Д», вакцинные штаммы Сэбина вируса полиомиелита, клещевого энцефалита. Линия М-22 успешно применяется для лечения ожоговых ран в НИИ Скорой помощи им. Н.В. Склифосовского (Патент на изобретение № 2373944 от 27.11.09).

Характеристика линии 4647. Линия клеток 4647 получена в 1974 г. из почек взрослой зеленой мартышки. Линия 4647, названная по регистрационному номеру обезьяны, была использована в производстве живой полиовакцины и контрольные культуры были обследованы на отсутствие контаминантов. Сама линия 4647 установлена из контрольных культур в результате первого пассажа на 24 сутки после эксплантации. При получении линии перевиваемых клеток пассировали первичные культуры 144 обезьян, также прошедших контроль. Только одна попытка оказалась успешной, когда была получена линия 4647 (3). В 1983 году был создан банк посевных клеток на 90 пассаже с всесторонним изучением их свойств. Для изучения банка клеток были восстановлены клетки на уровне 90 пассажа и проведены 40 последовательных пассажей. После криоконсервирования жизнеспособность клеток составляла 82,5 ± 3,4 %. Индекс пролиферации на уровнях 101-123 пассажей составлял 3,2-2,9. Число популяционных удвоений колебалось от 1,3 до 1,66, время генерации — 43,6-63,2 часа. При гистологическом изучении линии на уровнях 103-127 пассажей отмечен плотный, ровный монослой, состоящий из полигональных эпителиоподобных клеток, содержащих округлые ядра, преимущественно с 2-3 ядрышками и мелкими глыбками хроматина. Отмечалась обычная локализация и содержание ДНК и РНК, мелкие глыбки гликогена, а также щелочной и кислой фосфатаз. Цитоплазматических и внутриядерных включений не выявлено. При электронномикроскопическом исследовании никаких посторонних образований не обнаружено. Аналогичные данные были получены в опытах на чувствительных культурах клеток и животных. Наличие онкогенных потенций посевного банка клеток исследовано в системе in vivo на иммуносупрессированных мышах линии СВА и в системе in vitro в органной культуре кожи куриного эмбриона. Видовая принадлежность клеток посевного банка определена с помощью биохимического исследования и кариологического анализа. Энзимограммы изоферментов глюкоза-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) линии 4647 показали, что клетки имеют Г-6-ФДГ, обладающую подвижностью типа А (быстрая форма), и 5 изоформ ЛДГ, характерных для клеток зеленых мартышек. Кариологическое исследование банка было проведено на 96, 105, 115 и 130 уровнях пассажей. Установлено, что кариотип идентичен кариотипу зеленой мартышки, модальный класс представлен 120 хромосомами. Анализ 200 метафазных пластинок выявил, что количество тетраплоидных клеток составляет 44-48 %, гиперплоидных — 34-40 %, диплоидных — 10-16 %, гипоплоидных — 4-6 %. В клетках линии 4647 хорошо размножаются адено-, цитомегаловирус обезьян, пенящий вирус, вирус простого герпеса, вакцинные вирусы бешенства, клещевого энцефалита, чумы плотоядных, вакцинные штаммы вируса полиомиелеита и многие энтеровирусы, кори, паротита. Специфичность цитопатических изменений ряда вирусов была подтверждена с помощью непрямого метода флюоресцирующих антител.

Таким образом, созданный банк линии 4647 полностью удовлетворяет рекомендациям ВОЗ. Отмечено, что все изученные характеристики клеток оставались стабильными в течение срока наблюдений (40 пассажей). Показано, что линия 4647 свободна от посторонних агентов, не обладает онкогенной активностью, чувствительна к заражению различными вирусами, в том числе к ряду вакцинных штаммов. С использованием клеток 4647 выпущены производственные серии вакцины против чумы плотоядных. Созданы экспериментальные серии вакцин против полиомиелита, клещевого энцефалита, диагностикумы клещевого и японского энцефалитов, лимфоцитарного хориоменингита.

В ГНЦ ВБ «Вектор» приготовлена вакцина против гепатита А «Геп-А-инВАК». Здесь же запланировано производство рекомбинантной бивакцины против натуральной оспы и гепатита В. Группа авторов (12 человек) сообщила о создании посевного и рабочего банков культуры клеток 4647. Показано, что культура клеток в составе этих банков имеет высокую пролиферативную активность, типичную для линии 4647 морфологию, биологические свойства и характерные для клеток африканской зеленой мартышки кариотип и энзимограмму. Линия не контаминирована бактериями, грибами, микоплазмами, вирусами, в том числе и онкогенными. Планируется использование рекомбинантного штамма вируса вакцины в 7, 5S2-S и гепатита В перорального применения (в таблетированной форме) (4).

Таким образом, мы владеем потентным криобанком культур клеток человека и животных, которые могут быть успешно применены в широкой вирусологической практике. Неудовлетворительное использование имеющихся линий клеток наносит, на наш взгляд, необъяснимый ущерб национальному здравоохранению и замедляет прогресс в деле разработки методов диагностики и средств для профилактики вирусных инфекций.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: